Expresión de la proteína recombinante Bm86uy-r y evaluación de su respuesta inmune humoral en bovinos inmunizados

Abstract

El objetivo de éste trabajo fue la expresión de la proteína recombinante Bm86uy y la evaluación de la respuesta de anticuerpos contra ésta, para evaluar si potencialmente podrá ser usada en una futura vacuna. Nuestros resultados indican que se produjo una isoforma recombinante del antígeno Bm86 (Bm86uy-r) con un sistema de expresión basado en E. coli. Nuestro grupo de trabajo logró finalmente la expresión de la BM86uy-r en E.coli BL21 (DE3) pLysS utilizando el medio Luria Bertain (LB). Los mejores resultados se obtuvieron a 37ºC realizando agitación constante de 160 rpm, con adición de IPTG en una concentración final de 1mM y con un tiempo de incubación de 2 horas. La proteína obtenida presento un peso molecular de 70 kda. Posteriormente se realizó un ensayo de vacunación en bovinos con dicho antígeno. La evaluación de la respuesta inmune humoral se determinó mediante el estudio de la cinética de anticuerpos, utilizando ELISA, y de respuesta específica por medio de Western Blot.